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ELISA方法类型

常用的ELISA方法类型有4种，分别为直接法、间接法、夹心法和竞争法，Biorbyt科研小助手给大家整理的不同种类elisa的主要区别。

biorbyt整理并录制了ELISA间接法操作视频，

想了解ELISA间接法操作：

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在选择你的***盒之前，需确保它与你的靶标和样品的相兼容性。即理想情况下，您选择的***盒可以完全应用于您正在测试的样品（即血浆，尿液，***培养，唾液等）。其次检查***盒检测范围和***盒的灵敏度是否合适，保证该***盒能够检测到你正在验证的物种中的靶标。

每个***盒都是为了检测特定目标而研发的，并且具有特异性，但它不是“一刀切”。所以提前了解您ELISA***盒的灵敏度和特异性，以及如何准确地进行每个步骤，如何产生一个准确和可靠的标准曲线，显示您目标靶标的量化是很重要的。每个***盒都含有目标特异性***和缓冲液，您需要在开始实验前了解并理解每组参数，例如***类型，孵育时间，温度和报告系统。提前熟悉这些因素将节省您大量时间和避免失败重复的挫折感。

elisa实验中，恰当的洗涤步骤对于减少由于未结合的偶联***引起的背景信号是必要的，所以正确的洗涤步骤有助于增加分析的信噪比和保证单一特异性结合。

确保洗涤液体积足够多，以除去孔中游离的抗原或***的痕迹，从而减少不需要的背景信号。

保持孔底和洗涤端之间的建议距离，以减少残留的***/抗原液体，从而影响信号。浮动头更灵活，更容易获得完整的清洗。重复循环洗涤以确保除去不需要的抗原和***，但已结合的***会保留在结合原位。

Biorbyt建议在每次孵育后进行三次洗涤。根据您所使用的板子是出厂包被还是您自己包被的，可以对洗涤方式进行调整，如果是您自己包被的板子，您可能需要增加清洗次数。

保证整个ELISA试验过程的准确性将提高您对数据的信心。您的目标是以高精que度生成多条标准曲线。您需要至少以一个样本两次重复（是三个重复）测试您的样本。您需要每个重复之间维持*小的可变系数（％CV），保证重复结果的稳定性。如果数值明显异常，就需要分析可能导致结果异常的潜在原因。异常数值产生的一个可能原因是由于96孔板生产原因或由于外部孔引起的“边缘效应”。会影响实验CV值的因素还包括：样品不正确的储存或制备方式，孔中有气泡，洗板不完全，***混合不当，不恰当的温度控制以及移液操作技术。光密度（OD）高于或低于标准曲线线性范围的样品将分别导致目标浓度被低估或被高估。